簡要描述:
β半乳糖苷酶(βGAL)測試盒廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解,此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量,還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解,釋放自由的半乳糖。
更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:715
商品屬性:
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3242 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3242-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
商品詳情:
β半乳糖苷酶(βGAL)測試盒測定意義:
β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解,此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量,還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解,釋放自由的半乳糖。
測定原理:
β-GAL分解對--β-D-吡喃半乳糖苷生成對-酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL活性。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。
3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。
4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。
注意:空白管和標準管只需要測定一次。
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