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ELISA試劑盒檢測(cè)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法
更新時(shí)間:2020-09-28   點(diǎn)擊次數(shù):636次
  ELISA試劑盒檢測(cè)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法
  ELISA試劑盒檢測(cè)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題還是很多的下面所提到的是我司在檢測(cè)過(guò)程中所遇到的一些ELISA產(chǎn)品會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及解決方法:
  1. 加入反應(yīng)終止液后,沒(méi)有吸光值或吸光值偏低。
  a.原因:未加入酶標(biāo)記物。
  解決辦法:請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。
  b.原因:試劑盒內(nèi)容物未能充分回。
  解決辦法:確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。
  c.原因:室溫太低。
  解決辦法:若室溫太低(<19℃),請(qǐng)于操作步驟4,適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。
  d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。
  解決辦法: 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。
  e.原因:試劑盒已過(guò)有效期限。
  解決辦法:請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。
  2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好。
  a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
  解決辦法: 請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
  b.原因:操作時(shí)間拖太久。
  解決辦法:請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。
  c.原因:微孔間相互污染。
  解決辦法: 加樣品時(shí),請(qǐng)小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
  d.原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
  解決辦法:請(qǐng)使用已校正過(guò)的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。
  e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。
  解決辦法:加樣品或試劑時(shí),吸頭請(qǐng)勿接觸微孔。
  f.原因:洗板過(guò)程發(fā)生問(wèn)題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
  解決辦法:請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過(guò)程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
  3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
  a.原因:室溫太高(>25℃)。
  解決辦法: 若無(wú)法降低室內(nèi)溫度,請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
  b.原因:底物溶液受到污染。
  解決辦法: 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請(qǐng)不要再使用。
  c.原因:反應(yīng)時(shí)間超過(guò)太久。
  解決辦法:請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。
  d.原因:酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
  解決辦法:使用過(guò)的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過(guò)的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無(wú)殘留)
  4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。
  a.原因:微孔中的試劑未能充分混合。
  解決辦法: 試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻。
  b.原因:洗板過(guò)程發(fā)生問(wèn)題。
  解決辦法:請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過(guò)程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
  c.原因:添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。
  解決辦法: 請(qǐng)使用已校正過(guò)的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。
 

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